Pathomorphological and immunohistochemical characteristics of changes in the brain of aged dogs

Abstract

Starenje je univerzalni biološki proces tokom kojeg mogu nastati brojne promene u moţdanom tkivu. Neke od starosnih promena su makroskopski vidljive, dok se većina moţe otkriti histološkom analizom. U ovom radu ispitivano je prisustvo starosnih promena u moţdanom tkivu 36 pasa, koji su bili podeljeni u dve grupe: kontrolnu i eksperimentalnu. Kontrolnu grupu je ĉinilo 6 pasa starosti do pet godina, a eksperimentalnu 30 pasa starijih od deset godina. Nakon obavljene nekropsije moţdano tkivo pasa je makroskopski analizirano, fiksirano u formalinu i uklapano u parafinske blokove. Tkivni iseĉci su bojeni metodama: hematoksilin eozin, kongo crveno, modifikovana Ziehl Neelsen, PAS i imunohistohemijskom tehnikom streptavidin-biotin (LSAB2). Od primaranih antitela korišćena su: poliklonsko antitelo za beta amiloid (Aβ1-14), monoklonsko antitelo za beta amiloid (Aβ1-42), poliklonsko antitelo za amiloid prekursor protein, monoklonsko antitelo za ubikvitin, monoklonsko antitelo za metalotionein I i II, poliklonsko antitelo za GFAP i poliklonsko antitelo za tau protein. Makroskopskim ispitivanjem mozga kod eksperimentalnih ţivotinja uoĉene su promene, koje su se ispoljavale kao difuzno zadebljanje mekih moţdanica, kortikalna atrofija sa suţenjem vijuga i proširenjem brazda i blago proširenje lateralnih moţdanih komora. Histološkom analizom moţdanog tkiva ustanovljene su sledeće promene: fibroza moţdanica i zida krvnih sudova, neuronofagija, satelitoza, astrocitoza, astroglioza, depoziti amiloida, nakupine lipofuscina, prisustvo ubikvitinskih granula i poliglukozanskih tela. Prisustvo starosnih promena ispitivano je u frontalnoj i parijetalnoj kori, hipokampusu, malom mozgu i produţenoj moţdini. Segmenti mozga koji su najĉešće zahvaćeni histološkim promenama bili su frontalna i parijetalna kora, kao i hipokampus. Depoziti amiloida su dokazani metodom bojenja kongo crvenog i imunohistohemijski u zidu cerebralnih krvnih sudova i moţdanom parenhimu. Amiloid u zidu parenhimskih i meningealnih krvnih sudova dokazan metodom bojenja kongo crvenog pod polarizacionim svetlom pokazivao je ţuto zelenu fluorescenciju. Ovi depoziti bili su imunohistohemijski pozitivni na Aβ1-14 i Aβ1-42. Amiloid se u moţdanom parenhimu nakuplja ekstracelularno u obliku plakova i intracelularno...